弓形虫IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
中文名称：弓形虫IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
【包装规格】
48人份／盒、96人份／盒。
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【预期用途】
定性检测人血清或血浆样本中的弓形虫IgM抗体。
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用于弓形虫熏染的辅助诊断。
。。检测不得用于无症状人群的产前筛查；；不得将本试剂的检测效果单独作为终止妊娠的依据。
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弓形虫。
。。═oxoplasmosis）又称弓形体。
。。，，是由刚地弓形虫所引起的人畜共患病。
。。本病盛行于天下各地，，，弓形虫是一种原虫，，，险些所有的哺乳动物都有弓形虫寄生，，，是人类的熏染源，，，其中，，，猫和猫科动物在熏染此病时最为主要，，，由于常有大宗的熏染性卵囊随猫的粪便倾轧，，，污染外界情形，，，如人手、食具、食物或水被卵囊污染，，，即可经口熏染；；猫狗的唾液中可有弓形虫，，，与猫狗玩耍时，，，手、脸被舔也可被熏染，，，其次是猪、牛、羊，，，它们的肌肉中也可有包囊，，，未煮食用也可经口熏染，，，差别国家和地区熏染率差别性很大，，，平均在25～50%左右。
。。外洋报道人群自然熏染率为50～80%[1]，，，海内为0.1～47.3%，，，平均为5.17%[2,3]。
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文献报道[4~6]，，，由于肿瘤放疗、化疗的开展，，，致使患者免疫功效低下，，，而伴发弓形虫熏染，，，甚至造成殒命。
。。外洋某些国家已将弓形虫血清学检测作为肿瘤病人通例检查[7]。
。。孕妇熏染弓形虫后，，，可通过胎盘笔直撒播给胎儿，，，损害胚胎发育，，，引起胎儿严重的神经系统发育畸形和智力障碍，，，降低生齿素质，，，甚至引起殒命。
。。近期海内研究批注，，，我国孕妇弓形虫熏染较普遍，，，对下一代的康健带来严重威胁[8~9]。
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一般情形下，，，弓形虫熏染后首先泛起抗弓形虫IgM抗体上升，，，可在熏染后6天左右被测知，，，然后逐渐上升并维持数周至数月，，，最后逐渐下降直至消逝[10]，，，故测定弓形虫IgM抗体适用于早期诊断，，，而弓形虫IgG抗体的泛起晚于IgM，，，熏染后2～3个月才达峰值，，，维持时间也较长，，，因此消逝也较晚。
。。IgG抗体阳性说明一经熏染过弓形虫，，，一般多为慢性熏染，，，但也可为急性熏染。
。。在第一次检测IgG抗体后2～3周再用同样的要领举行检测，，，如抗体的效价有4倍以上的增添，，，则具有诊断价值。
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间接ELISA或IFA检测IgM抗体时，，，类风湿因子（RF）和抗核抗体（ANA）的保存可引起假阳性反映，，，而高滴度的IgG竞争作用又可导致假阴性。
。。ELISA捕获法检测IgM在迅速度与特异性方面战胜上述缺陷而成为检测IgM抗体的首选要领。
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【磨练原理】
酶联免疫捕获法原理：用抗人IgM-μ链单克隆抗体包被微孔板，，，加待检者血清或血浆到板孔中，，，样品中保存的IgM抗体特异性地与微孔板外貌的抗人IgM-μ链抗体形成抗体－二抗复合物，，，加入酶标记弓形虫抗体及弓形虫抗原，，，形成（抗体－二抗－抗原－抗弓形虫酶标记物）免疫复合物，，，加入底物后在酶作用下爆发颜色反映，，，通过酶标仪测定显色反映的强弱即可定性检测待测样品中的弓形虫IgM抗体。
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【主要组成因素】
1. 本试剂盒中包括的组分：
序号 组分名称 主要因素 使用要领 装量
    96人份/盒 48人份/盒
1 预包被抗人IgM-μ链抗体的微孔板 微孔板中预包被小鼠抗人IgM-μ链单克隆抗体。
。。 直接使用，，，可拆成单孔使用 96孔 48孔
2 弓形虫抗体酶标记物 辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗弓形虫单抗；；硼酸盐缓冲液，，，含弓形虫抗原、防腐剂、卵白稳固剂。
。。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 弓形虫IgM抗体阳性比照 弓形虫IgM抗体阳性人血清或血浆；；硼酸盐缓冲液，，，含0.02%硫柳汞、卵白稳固剂。
。。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 弓形虫IgM抗体阴性比照 弓形虫IgM抗体阴性人血清或血浆；；硼酸盐缓冲液，，，含0.02%硫柳汞、卵白稳固剂。
。。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 弓形虫IgM抗体临界比照 弓形虫IgM抗体阳性人血清或血浆；；硼酸盐缓冲液，，，含0.02%硫柳汞、卵白稳固剂。
。。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 显色液A 柠檬酸、过氧化氢。
。。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 显色液B 柠檬酸、四甲基联苯胺（TMB）。
。。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 浓缩洗涤液
（10倍） 磷酸盐缓冲液，，，含0.5%吐温-20，，，10倍浓缩。
。。 用蒸馏水或去离子水10倍稀释后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 样品稀释液（IgM） 硼酸盐缓冲液，，，含甘油。
。。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 终止液 0.5 mol/L 硫酸溶液。
。。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1个 1个
12 封板膜   1片 4片
13 纪录纸   1份 1份
注：酶标记物、临界比照、阳性比照、阴性比照，，，必需使用试剂盒配备的，，，不可使用其它批号产品。
。。样品稀释液（IgM）可用于本公司IgM抗体检测系列的ELISA试剂盒。
。。显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液为通用试剂，，，可以用于本公司所有ELISA试剂盒。
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2. 需要但未提供的质料：
蒸馏水或去离子水
微孔板洗濯器
10μL～100μL、1mL移液器与一次性吸嘴
37℃恒温装备
微孔振荡器
酶标仪
60分钟或更长时程的计时器
【贮存条件及有用期】
于2℃～8℃避光生涯，，，有用期为12个月。
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拆封后未用完的微孔板应放入密封袋内2～8℃生涯。
。。液体组分应拧紧瓶盖2～8℃生涯。
。。各组分拆封后应在一个月内用完。
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生产日期及失效日期见标签。
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【适用仪器】
具有450nm和630nm波长的酶标仪
【样本要求】
应凭证临床采血手艺规范操作收罗血清或血浆样品。
。。室温生涯样品不要凌驾8小时；；若实验在8小时以后举行，，，需将样品生涯在2℃～8℃；；如生涯凌驾1周则生涯在-20℃以下，，，并阻止重复冻融。
。。本试验可用于含乙二胺四乙酸（EDTA）、柠檬酸钠、肝素钠、草酸钠、双草酸盐抗凝剂样本的检测，，，但含其它种类抗凝剂的样本能否用于本试验尚无实验数据。
。。只管胆红素、血红卵白、甘油三酯对本试剂盒检测效果无显著滋扰，，，仍应阻止使用黄疸、溶血或高血脂样品。
。。显着被污染的样品不可用于检测。
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【磨练要领】
1. 试验历程注重事项
1.1 试剂盒各组分从冷藏情形中取出时，，，应在室温平衡至无潮气方可使用。
。。拆封后未用完的包被板应放入密封袋内生涯。
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1.2 在贮存及孵育历程中，，，应阻止强光直接照射。
。。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染。
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1.3 为阻止试剂或样品的微生物污染及交织污染，，，应使用一次性吸嘴，，，不要重复使用。
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1.4 在取用比照品和酶标记物之前应轻轻摇动使其充分混匀，，，加样前，，，使用微孔振荡器充分混匀稀释过的样品。
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1.5 严酷遵守划定的孵育时间和温度。
。。若是第一个孔与最后一个孔加样之间的时间距离太长，，，将会导致差别的“预孵育”时间，，，从而显着地影响到丈量值的准确性及重复性。
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1.6 洗涤竣事时，，，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻小扣打，，，以确保所有孔内均无洗涤缓冲液，，，阻止爆发泡沫。
。。若是使用自动洗板机，，，应注重准确操作。
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2. 试验准备
2.1 试剂盒反映试剂准备
2.1.1 微孔条
将检测所需数目的微孔条牢靠于板架上，，，剩余的微孔条放入密封袋中生涯。
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2.1.2 洗涤液
在清洁的量筒内稀释浓缩洗涤液。
。。50mL浓缩洗涤液加入蒸馏水或去离子水至500mL，，，混匀。
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2.1.3 其它液体组分
直接使用，，，使用前应轻轻摇动使其充分混匀。
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2.2 样品准备
样品1:100稀释：取10μL待检样品，，，加入至含有1mL样品稀释液（IgM）的小试管内，，，充分混匀。
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3. 检测历程
3.1 每次实验每板须设空缺孔、阳性比照、阴性比照各1孔，，，临界比照3孔。
。？？？杖笨撞患友泛兔副昙俏铮，，只加洗液、显色液A、显色液B和终止液；；阳性比照、阴性比照、临界比照直接使用，，，100μL/孔。
。。其余每孔加入稀释后样品100μL。
。。置37℃孵育60分钟。
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3.2 甩净孔中液体，，，将洗液注满每孔（约300μL/孔）后，，，停留1分钟后甩净拍干，，，重复3次。
。。除空缺孔外每孔加酶标记物50μL，，，置37℃孵育60分钟。
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3.3 甩净孔中液体，，，同上洗板3次，，，拍干后各孔加显色液A、显色液B各50μL，，，置37℃避光10～15分钟，，，每孔加入终止液50μL，，，稍微震荡微孔板以混淆匀称。
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3.4 以空缺孔调零，，，用酶标仪读取450nm处的A值。
。；；蛞运ǔぃˋ450nm－A630nm）盘算A值。
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4. 质量控制
阳性比照A值≥0.30，，，阴性比照A值≤0.15，，，临界比照A值平均值≥0.15，，，证实实验建设；；否则试验效果无效，，，需重新试验。
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【阳性判断值】
样品A值＜临界比照值均值为阴性，，，样品A值≥临界比照值均值为阳性。
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【磨练效果的诠释】
1. 效果为阳性提醒弓形虫急性或近期熏染，，，对阳性效果建议1～2周后再次采样检测，，，动态视察抗体水平的转变。
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2. 检测效果仅供临床参考，，，临床医生应连系病史、症状及其它检测效果做出诊断。
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【磨练要领的局限性】
1. 样品或试剂被微生物污染以及试剂的交织污染可能导致过失效果。
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2. 实验效果批注本品与交织反映项目中所列滋扰因子血清无交织反映，，，但与其它滋扰因子的交织反映尚无实验数据。
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【产品性能指标】
1. 迅速度、特异性
通过1122例临床研究，，，本品与通过CE认证的同类入面试剂较量，，，迅速度为96.4%，，，特异度为99.7%。
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2. 重复性
用细密性参考品测定，，，CV（%）不高于15%（n＝10）。
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3. 交织反映
与类风湿因子及以下病原体的IgM抗体阳性血清无交织反映：血吸虫、风疹病毒、麻疹病毒、纯粹疱疹Ⅰ型病毒、纯粹疱疹Ⅱ型病毒、巨细胞病毒。
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4. 滋扰试验
4.1 与样品接触的抗凝剂（EDTA、柠檬酸钠、肝素钠、草酸钠、双草酸盐）对本品检测效果无显著滋扰。
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4.2 内源性物质胆红素、血红卵白、甘油三酯对本品检测效果无显著滋扰。
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4.3 纤维卵白原对本品检测效果无显著滋扰，，，因此本品可检测人血清或血浆样品。
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【注重事项】
1. 本品仅用于体外诊断，，，一次性使用。
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2. 用于制备本试剂盒阴性比照、阳性比照、临界比照的血清或血浆已经乙肝外貌抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体抗体和人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测为阴性，，，试剂盒内其它种种组分均无生物熏染性。
。。由于不可包管检测各组分所有的熏染性因素，，，因此本试剂盒应作为具有潜在的熏染性子料看待，，，所有接触试剂盒的职员应按实验室规范要求举行操作。
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3. 任何临床样品都应作为具有熏染性样品看待。
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4. 待检样品及其他潜在熏染质料试验后应予以消毒。
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5. 注重阻止皮肤或黏膜直接接触试剂或样品。
。。显色液中含TMB，，，终止液含硫酸。
。。含TMB的试剂在试验中会诱发其它反映；；含硫酸的试剂有侵蚀性。
。。一旦接触到这些液体，，，应连忙用水彻底洗濯。
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【标识的诠释】
包装标签
的标识    
标识的寄义 温度限制 体外诊断医疗器械 参考使用说明 不得二次使用
【参考文献】
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【基本信息】
注册人/生产企业名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
住所：珠海市唐家湾镇港湾大道立异四路18号     
联系方式：电话号码：0756-3890858
传真号码：0756-3890848
售后服务单位名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
联系方式：电话号码：0756-3890858
生产地点：珠海市唐家湾镇港湾大道立异四路18号     
生产允许证编号：粤食药监械生产许20040941号
【医疗器械注册证书编号/产品手艺要求编号】国械注准20163402554
【说明书批准及修他日期】2016年12月29日